期刊简介

               本刊是国内外公开发行的国家级现代综合骨科学术期刊。坚持面向临床、面向基层、普及与提高、理论联系实际的办刊方针,并强调信息权威性、理论前沿性、实践创新性。重点介绍脊柱四肢骨创伤、骨疾病、骨肿瘤、先后天畸形等各种原因引起的肢体残疾矫治与康复的新成果、新进展、新经验。现已被十余种数据库及权威性文摘期刊收录。                

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  • 杂志名称:中国矫形外科杂志
  • 主管单位:中国残疾人联合会
  • 主办单位:中国残疾人康复协会 中国人民解放军第八十八医院
  • 国际刊号:1005-8478
  • 国内刊号:37-1247/R
  • 出版周期:半月刊
期刊荣誉:华东地区优秀期刊期刊收录:CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏, 剑桥科学文摘, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 哥白尼索引(波兰), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中), 万方收录(中)
中国矫形外科杂志2017年第01期

人老化椎间盘髓核细胞体外老化模型的建立与细胞老化表型的初步研究

康新桂;吴小涛;王锋;宋鹏;时睿;蔡峰;闫凯

关键词:细胞老化, 生长因子, 椎间盘退变, 髓核细胞, 氧化应激, 双氧水
摘要:[目的]构建人椎间盘髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPCs)老化模型,探讨老化NPCs中生长因子的表达差异及其与椎间盘退变(intervertebral disc degeneretion,IDD)的关系.[方法]体外单层培养人正常NPCs系(Scien Cell 4800),连续1∶2传代培养,诱导建立NPCs复制性老化(replication senescence cells,RS)模型;不同浓度双氧水作用于未老化细胞,模拟椎间盘氧化应激微环境,诱导建立应激诱导过早老化(stress induced premature senescence cells,SIPS)模型.细胞衰老β-半乳糖苷酶(senescence-associatedβ-galactosidase,SA-β-gal)染色检测NPCs阳性表达率.流式细胞仪检测G1期细胞比例及细胞凋亡率.CCK-8检测不同代次细胞增殖活性.应用Agilent表达谱芯片初步筛选出正常与老化NPCs中差异性表达的生长因子,实时荧光定量PCR进一步验证所筛选生长因子的表达差异.[结果] NPCs经连续传代、双氧水诱导可分别构建RS模型及SIPS模型.两种老化模型SA-β-Gal阳性表达的细胞比例均高于70%,G1期细胞比例均高于80%,凋亡率均低于10%.Agilent表达谱芯片筛选出的碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)与血管内皮生长因子a(vascular endothelial growth factor a,VEGF-a)在不同老化模型中,表达差异有统计学意义(P<0.05),特别是bFGF在SIPS模型中的表达显著高于RS模型(P<0.05).两种老化模型中的bFGF表达量显著高于正常组(P<0.05).[结论]双氧水诱导所引起的氧化应激可促进细胞过早老化.老化NPCs上调bFGF,且SIPS模型中的上调幅度显著高于RS,SIPS可能比RS更加上调bFGF.不同老化诱导条件下,生长因子的表达可能存在差异,bFGF可能参与椎间盘再血管化及自我修复.