期刊简介
本刊是国内外公开发行的国家级现代综合骨科学术期刊。坚持面向临床、面向基层、普及与提高、理论联系实际的办刊方针，并强调信息权威性、理论前沿性、实践创新性。重点介绍脊柱四肢骨创伤、骨疾病、骨肿瘤、先后天畸形等各种原因引起的肢体残疾矫治与康复的新成果、新进展、新经验。现已被十余种数据库及权威性文摘期刊收录。
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首页>中国矫形外科杂志
- 杂志名称：中国矫形外科杂志
- 主管单位：中国残疾人联合会
- 主办单位：中国残疾人康复协会 中国人民解放军第八十八医院
- 国际刊号：1005-8478
- 国内刊号：37-1247/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：华东地区优秀期刊期刊收录：CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏, 剑桥科学文摘, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 哥白尼索引(波兰), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中), 万方收录(中)
携带人VEGF_(165)和ANG-1双基因的腺病毒载体的构建及目的基因的表达
张金康；孟国林；刘建；胡蕴玉；袁志；段春光；毕龙；白峰；黄鑫；禚文昆；李国臣
关键词：血管内皮细胞生长因子165, 血管生成素-1, 腺病毒载体, 基因转染
摘要：[目的]构建并鉴定携带人血管内皮细胞生长因子165(VEGF_(165))和血管生成素-1(ANG-1)双基因共表达重组腺病毒载体pAd-VIA.[方法]采用基因克隆技术克隆目的基因VEGF_(165)、ANG-1基因,将得到的基因通过引入内部核糖体进入位点序列(IRES),亚克隆至含有报告基因EGFP的穿梭载体pTrack-CMV中,构建携带双基因的腺病毒穿梭载体pTrack-CMV-VIA.进而使用AdEasy~(TM)腺病毒系统重组并包装腺病毒.通过绿色荧光蛋白(GFP)表达、酶联免疫吸附分析(ELISA)方法检测制备的腺病毒pad-VIA感染的大鼠骨髓基质干细胞中外源基因VEGF_(165)及Ang-1的表达.[结果]该藿组腺病毒质粒经测序、酶切鉴定,证明基因序列正确.转染QBI-293A细胞后,可观察到GFP明显表达.重组合腺病毒载体pad-VIA获得成功包装,扩增后病毒滴度为2×10~(10)PFU/ml,大鼠骨髓基质干细胞转染48 h后,绿色荧光蛋白表达阳性,ELISA结果显示转染组在感染48 h后,培养细胞上清中的VEGF_(165)浓度为(42.5±2.082)ng/10~5细胞,ANG-1浓度为(16.67±2.08)ng/10~5细胞,未转染组几乎未检测到外源基因的表达,有统计学差异(P<0.05).[结论]成功构建携带人VEGF_(165)、ANG-1双基因共表达重组腺病毒载体,为组织工程人工骨血管化的研究奠定基础.
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