期刊简介
本刊是国内外公开发行的国家级现代综合骨科学术期刊。坚持面向临床、面向基层、普及与提高、理论联系实际的办刊方针，并强调信息权威性、理论前沿性、实践创新性。重点介绍脊柱四肢骨创伤、骨疾病、骨肿瘤、先后天畸形等各种原因引起的肢体残疾矫治与康复的新成果、新进展、新经验。现已被十余种数据库及权威性文摘期刊收录。
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首页>中国矫形外科杂志
- 杂志名称：中国矫形外科杂志
- 主管单位：中国残疾人联合会
- 主办单位：中国残疾人康复协会 中国人民解放军第八十八医院
- 国际刊号：1005-8478
- 国内刊号：37-1247/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：华东地区优秀期刊期刊收录：CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏, 剑桥科学文摘, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 哥白尼索引(波兰), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 维普收录(中), 万方收录(中)
hIGF-Ⅰ基因转染体外培养半月板细胞的转染条件筛选
张海宁；侯筱魁；汤亭亭；张洁；冷萍
关键词：半月板, 细胞, 胰岛素样生长因子, 基因, 转染
摘要：目的:探索FuGene 6介导重组质粒pIRES2-EGFP-hIGF-Ⅰ转染半月板细胞的转染条件.方法:切取成年山羊半月板,剪碎后Ⅱ型胶原酶消化,离心收集细胞.1×105/孔接种6孔细胞培养板,37℃、5%CO2、饱和湿度培养.绘制生长曲线并行台盼蓝染色.用FuGene 6介导,将真核表达质粒pIRES2-EGFP-hIGF-Ⅰ转染第二代半月板细胞,设定2:1、3:1、3:2、6:1转染比例.分为透明质酸酶处理实验组和不处理对照组.又分为将混合物直接加入培养基或将培养基吸除后加入.在不同时间用倒置荧光显微镜观察EGFP的表达并计算转染效率.加入终浓度为100mg/L～600mg/L的G418培养基筛选.结果:半月板细胞形态为长梭形和多角形混合.转染后4h即有EGFP表达,至48h达高峰.各比例以3:1组高;其次为6:1;2:1组与3:2组低.用透明质酸酶处理的转染效率均略高于未处理组.将混合物直接加入培养基或将培养基吸除后加入混合物,两种方法效率无明显差异.400mg/L的G418终浓度符合筛选标准.筛选2周可形成阳性克隆.结论:利用FuGene 6可以有效介导重组质粒pIRES2-EGFP-hIGF-Ⅰ转染体外培养的半月板细胞,以3:1为佳比例,采用透明质酸酶处理可以提高转染效率.
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